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本文標(biāo)題:光鏡顯微鏡下觀測過氧化物酶的化學(xué)反應(yīng)步驟

信息分類:信息交流 新聞來源:未知 發(fā)布時間:2016-1-30 16:33:39
光鏡顯微鏡下觀測過氧化物酶的化學(xué)反應(yīng)步驟

     操作步驟
    (1)用3%戊二醛固定液固定不同時間的各類切片,用配固
定液的緩沖液漂洗。充分漂洗可使線粒體的內(nèi)源性細胞色素C流
失,抑制夾雜反應(yīng)。
    (2)在孵育液中37°C壁光反應(yīng)20-60min.
    (3)用0.05mol壓緩沖液(含6.5%蔗糖)漂洗。
    (4)光鏡直接觀察。電鏡用1.5%亞鐵氰化鉀一1%鋨酸后固定,
常規(guī)電鏡包埋、切片、觀察。
    對照
    (1)固定方法不同可顯示不同的過氧化物酶,固定時間長,
抑制過氧化氫酶,顯示髓過氧化物酶等酶的活性。
    (2)孵育液中加50mmol/L氰化鉀抑制中性粒細胞的過氧化
物酶,選擇性顯示嗜酸粒白細胞的髓過氧化物酶。
    (3)熱抑制大部分過氧化物酶。

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